对照品（纯度为99.00%;CAS号：95-49-1），丁香酚-D3内标物对照品（纯度为99.00%;CAS号：72-15-8;上海阿拉丁试剂有限公司）。
甲醇（色谱级;江苏平光制药有限责任公司）;肝素钠（南京健友生化制药股份有限公司）;水溶液为超纯水。
1.1.3 仪器与设备
液相色谱-质谱联用仪（岛津（香港）有限公司;型号：LCMS-2020）;SPE固相萃取小柱（60mg/3mL月旭科技（上海）股份有限公司;型号：57044）;台式冷冻离心机（山东博科生物产业有限公司;型号：TGL-16M）;氮吹仪（北京众信佳仪科技有限公司;型号：WD20）;超纯水仪（上海睿析科学仪器有限公司;型号：RX-UPTB）。
1.2 测定方法
1.2.1 配置标准溶液
把丁香酚对照品以及丁香酚-D3内标物对照品用甲醇溶液溶解、稀释，依次配成质量浓度为100ug/mL，1ug/L的标准液，放置在温度为零下20℃环境中，保存在时间为30天。在使用时配置成不同质量浓度的标准工作内液。
1.2.2 处理样品
选取5毫升血浆在15毫升离心管内，随后加入质量浓度为1ug/mL的丁香酚-D3内标溶液0.5 毫升，静置半小时，然后添加3mL甲醇，最后用离心机进行离心，离心机应调节至12000r/min，离心10min，将上清液转移至新15mL的离心管，同时在离心后的残渣中在此添加3ml甲醇，重复提取一次，随后打开提取液，向提取液中添加4毫升纯水，混匀备用。
把SPE小柱分别用甲醇、水活化各5毫升，随后把处理好的备用样品均上样，流速应控制在1.5—2ml/min，弃流出液;用5毫升体积分数为60%甲醇水溶液对固相萃取小柱冲洗两次;用5毫升甲醇溶液洗脱，并收集洗脱液，洗脱液应在40℃水浴条件下用氮气吹至蒋干，然后用甲醇定容1毫升，下清液过0.22um滤膜，上机检测。
1.3 数据处理方法
全部数据均应通过DAS2.00以及Excel软件进行计算处理。
2 结果与分析
药代动力学考察对于丁香酚麻醉浓度为45mg/L条件下，探讨丁香酚在罗非鱼血浆中的药代动力学。在0—18小时范围内取出罗非鱼血浆检测丁香酚残留量。采用DAS2.0软件，按照房室模型和统计矩理论，对药代动力学参数进行计算。由药代动力学参数可看出，丁香酚在罗非鱼血浆中的浓度与一级动力学参数相拟合，为二室模型，见表2。
3 讨论
现阶段，丁香酚作为鱼类麻醉剂被广泛应用[4]。此次通过进行理想麻醉浓度条件下，探讨丁香酚在罗非鱼血浆中药代动力学，其目的旨在为丁香酚在水产品行业的安全性评估提供可靠依据[5]。此次研究结果表明，丁香酚溶液浓度在45mg/L时，罗非鱼血浆中的丁香酚麻醉剂浓度与复苏时间均表现为衰减趋势，血浆中丁香酚最高血药浓度为4.27mg/L，消除半衰期为1.84h，平均滞留时间MRT0-∞为3.12h;药时曲线下面积AUC0-t为13.28Mg/（L*h）;丁香酚在罗非鱼血浆中半衰期越短，其消除率速率越快，药代动力学与二室模型保持一致。
参考文献：
[1] 黄武， 徐金龙， 刘建芳，等. 高效液相色谱法检测罗非鱼中丁香酚残留量[J]. 食品安全质量检测学报， 2018， 13（1）：103-106.
[2] 张媛媛，宋理平，胡斌 . 饲料中添加姜黄素对尼罗罗非鱼幼鱼生长和四氯化碳诱导肝损伤的影响[J]. 中国水产科学， 2018， 25（6）：1271-1280.
[3] 张新党，张曦，陶琳丽. 橡胶籽油替代鱼油对吉富罗非鱼幼鱼生长性能、消化酶活性、脂蛋白含量和抗氧化功能的影响[J]. 动物营养学报， 2018， 30（3）：1007-1018.
[4] 刘含亮，王纪亭，万文菊， 等.胰岛素受体-1在尼罗罗非鱼不同组织中的表达及其对注射葡萄糖的响应[J].动物营养学报，2017， 29（2）：652-662.
[5] 李丽春， 刘书贵， 尹怡，等. 气相色谱法测定罗非鱼肌肉和血浆中4种拟除虫菊酯类农药残留[J]. 中国渔业质量与标准， 2018， 14（1）：40-48.
