[摘要] 目的 探讨慢性肾病患者血清及尿透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）的表达及临床意义。 方法 选择2010年3月～2012年9月慢性肾病患者60例为病例组，根据肾脏功能情况将病例组分为慢性肾病肾功能正常组（Ⅰ组，n = 27），慢性肾病肾功能不全组（Ⅱ组，n = 18），慢性肾病肾衰竭组（Ⅲ组，n = 13），选择同期健康体检者40例为对照组。采用放射免疫法测定各组调查对象血清及尿中的HA及LN水平，比较对照组与慢性肾病患者的血清及尿HA、LN含量水平差异，同时比较不同肾脏功能状况的慢性肾病患者间血清及尿HA、LN含量的差异。 结果 Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组及对照组血清HA平均值分别为（80.16±11.49）、（114.55±10.74）、（206.78±26.84）、（40.69±8.16）μg/L，LN平均值分别为（136.43±20.45）、（196.68±39.15）、（234.12±33.96）、（102.36±10.94）μg/L，HA、LN水平在4组间差异有高度统计学意义（P < 0.01）；尿中Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组及对照组的HA平均值分别为（90.70±11.94）、（73.19±24.67）、（40.31±33.84）、（102.54±22.64）μg/L，LN平均值分别为（21.48±13.64）、（29.64±18.67）、（53.16±35.16）、（20.34±6.48）μg/L，HA、LN水平在4组间的差异有高度统计学意义（P < 0.01）。 结论 血清及尿HA、LN水平能够反映慢性肾病患者的肾功能情况，可以为慢性肾病的诊断提供依据。
[关键词] 慢性肾病；透明质酸；层粘连蛋白；临床检测
[中图分类号] R692 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）08（c）-0062-03
慢性肾病发生及发展的主要病理基础是肾的纤维化，肾纤维化可以引起肾小球及肾小管病变[1-6]，早期发现和诊断肾纤维化对控制慢性肾病的进展，逆转慢性肾病的发展具有重要意义。
肾脏的纤维化主要表现为细胞的增生、细胞外基质（EMC）的聚集。细胞外基质分布于细胞与细胞之间，由蛋白多糖、胶原蛋白及糖蛋白聚合而成，与细胞的生理功能有较为密切的关系[7-12]。正常生理状态下，细胞外基质的合成与降解处于动态平衡状态，由于各种因素破坏了平衡状态即可引起肾脏组织的结构发生改变，从而发生病理改变。透明质酸（HA）和层粘连蛋白（LN）是肾细胞外基质中重要的成分，其中HA属于蛋白多糖，LN是一种大分子糖蛋白，二者均是构成肾脏基质的主要成分[12-14]。因此评估血清及尿液中HA及LN的水平与慢性肾病的关系，可以确定其在临床检测中的意义，为今后慢性肾病的早诊早治奠定基础。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2010年3月～2012年9月慢性肾病患者60例为病例组，其中原发病为慢性肾小球肾炎34例、慢性间质性肾炎5例、高血压/糖尿病性肾病21例。慢性肾脏病的诊断标准参照《慢性肾脏疾病进展的检测和防治指南/肾脏病病人生存质量指导（K/DOQI）》[1]：①出现肾脏的结构或功能损伤超过3个月，伴或不伴肾小球滤过率降低，病理学、实验室、影像学检查证实存在肾脏损伤；②无论是否有肾脏损伤的检查结果，持续3个月以上肾小球滤过率低于60 mL/min。根据肾脏功能的情况，又将调查对象进一步分为慢性肾病肾功能正常组（Ⅰ组，n = 27），慢性肾病肾功能不全组（Ⅱ组，n = 18），慢性肾病肾衰竭组（Ⅲ组，n = 13），Ⅰ组患者肌酐清除率（Ccr）>70 mL/min，Ⅱ组Ccr为20～70 mL/min，Ⅲ组Ccr<20 mL/min。选择同期健康体检者40例为对照组。研究经医院伦理委员会通过，所有入组的调查对象均签署了知情同意书。
研究对象中，Ⅰ组患者27例，其中男16例，女11例，年龄31～72岁，平均（56.4±10.5）岁，平均血肌酐为（81.7±11.6）μmol/L；Ⅱ组患者18例，男11例，女7例，年龄30～69岁，平均（55.7±11.9）岁，平均血肌酐为（248.8±20.4）μmol/L；Ⅲ组患者13例，男9例，女6例，年龄34～66岁，平均（56.3±11.5）岁，平均血肌酐为（775.2±43.2）μmol/L。三组患者与对照组平均年龄及性别构成比等一般资料比较，差异均无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。见表1。
1.2 方法
1.2.1 血液及尿HA、LN的检测 采集所有研究对象清晨空腹静脉血2 mL，离心后取血清于-20℃保存待测，同时取清晨中段尿液10 mL离心后低温保存。采用放射免疫法测定采集的样品中的HA及LN。分析的试剂盒由上海赛默生物科技发展有限公司提供，操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。
1.2.2 研究方法 比较对照组与慢性肾病患者的血清及尿HA、LN含量水平差异，同时比较不同肾脏功能状况的慢性肾病患者间血清及尿HA、LN含量的差异。
1.3 统计学方法
采用统计软件SPSS 16.0对数据进行分析，正态分布计量资料以均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用方差分析，两两比较采用SNK法。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组血清HA、LN的水平
血清中HA、LN的水平在4组间的差异有统计学意义（P < 0.01），采用SNK法进行两两比较后，各组间的差异也有统计学意义（P < 0.05）。见表2。
2.2 各组尿HA、LN水平比较
尿中HA、LN的水平在4组间差异均有高度统计学意义（P < 0.01），采用SNK法进行两两比较后，各组间的差异也具有统计学意义（P < 0.05）。见表3。
3 讨论
肾脏是维持人体正常生理活动的重要器官之一，因此慢性肾病对人体健康有着巨大的影响。然而慢性肾病由于起病隐匿、进展缓慢，因此临床症状不明显，早诊率极低，患者发现罹患慢性肾病时往往已患病数年，肾脏功能已极为衰弱， 患者已处于终末阶段[15-20]，给患者个人、家庭及社会都带来较大的疾病经济负担。因此寻找到简便易行的临床检测方法诊断慢性肾病的发生就具有十分重要的意义。
既往常采用血肌酐评估肾脏功能的状况，但文献报道，其灵敏度不高，且受年龄、性别、种族的影响较大，并且由于肾脏的代偿能力较强，血肌酐升高时，肾脏功能已经发生了严重的减退，无法用于对慢性肾病患者进行早期诊断[21-25]。根据有关的理论报道，慢性肾病发生的最主要病理基础是肾脏的纤维化，肾脏的纤维化过程中，细胞外基质的过量累计是一个明显特征，同时也是慢性肾病向肾衰竭演变过程中一个影响因素。肾脏中的细胞外基质主要包括蛋白多糖、糖蛋白及胶原3类，本次研究选择了HA及LN作为检测指标进行检测。HA是细胞外基质中，蛋白多糖的一种，属于高分子的葡萄糖胺多糖，正常状态下HA处于合成和降解的动态平衡中，由于肾脏功能的异常导致合成增加、降解减少，引起HA组织中的含量升，由于肾脏功能的减退，表现为血液中HA含量的升高、尿液中含量的减少。LN也是细胞外基质中的重要组成成分，属于大分子糖蛋白，正常情况下较少通过肾小球基底膜进入尿中，因此也可作为检测慢性肾病发生的指标[12-16]。
本次研究的结果显示，血清及尿中HA、LN的水平在4组间的差异有统计学意义，采用SNK法进行两两比较后，各组间的差异也有统计学意义。说明血清及尿中HA、LN的水平能够区分出正常人群与慢性肾病患者，同时，对不同病变程度的慢性肾病患者，也具有良好的区分诊断效果，能够较为灵敏地反映不同的肾脏功能情况。肾脏功能受损越严重，血液中HA浓度越高，而尿中浓度越低；肾脏功能受损越严重时，血液中LN含量越高，但尿液中含量也越高，也说明LN主要来源于肾间质而不是肾小球，慢性肾病患者肾脏主要是间质而不是肾小球的损伤。研究结果与国内同类文献较为一致[7-18]。
综上所述，血清及尿HA、LN水平能够反映慢性肾病患者的肾功能情况，并且能区分不同程度的肾功能状况，可为临床诊断肾纤维化和慢性肾病提供依据。
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（收稿日期：2013-05-30 本文编辑：李继翔）
