江西建昌帮姜天麻与其他炮制品中天麻素的含量差异

对照品（批号：MUST-11122815，由成都曼斯特生物科技有限公司供应）；乙腈（色谱纯）；水为双蒸馏水；其余试剂均为分析纯。天麻和硫磺熏蒸天麻，均购自樟树市药材市场，由江西中医药大学龚千锋教授鉴定为兰科植物天麻Gastrodia elata BI.的干燥块茎。

2 方法与结果

2.1 炮制品制备

天麻生品：依照药典制法，取原药材，洗净，蒸透，切薄片，干燥，粉碎，待用。姜制天麻：取适量生姜，切片，压榨取汁，浸润生天麻片，待姜汁被吸尽后，于40℃条件下烘干，置粉碎机内粉碎，待用（生姜与天麻用量比约为12.5∶100）。另取硫磺熏天麻，洗净，切薄片，烘干，粉碎，待用。

2.2 色谱条件

色谱柱Ultimate3000 C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相乙腈-水（3∶97），检测波长220 nm，流速1 mL/min，柱温25℃。

2.3 对照品溶液的制备

取天麻素对照品，精密秤定，加乙腈-水（3∶97）混合制成每1 mL含天麻素50 μg的对照品溶液，即得所需的对照品溶液。

2.4 供试品溶液的制备

精密称取天麻生品细粉（过60目筛）约2 g，将其末放入具塞锥形瓶中，并精密加入50 mL稀乙醇，经超声处理30 min后，精密称定重量，取出后放冷，称量，计算超声前后损失的重量，用稀乙醇补足，0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液10 mL，移至25 mL容量瓶中定容，配比成3∶97的乙腈-水混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，即得天麻生品供试品溶液[13-16]。分别依法制备天麻姜制品和硫磺熏蒸品供试品溶液，备用。

2.5 线性关系考察

精密称定天麻素对照品，加乙腈-水（3∶97）分别制备成12.5、25、50、75、100、125 μg/mL对照品溶液，依据上述色谱条件测定，以对照品溶液浓度为横坐标X，峰面积为纵坐标Y，进行线性回归，绘制天麻素对照品标准曲线，得天麻素线行回归方程y = 0.6323x-0.669，R2 = 0.9995，表明天麻素在12.5～125 μg/mL溶度范围之间线性关系良好，见表1和图1～5。

2.6 精密度试验

精密称取天麻素对照品溶液，按“2.2”色谱条件测定，重复进样6次，测得峰面积的RSD为1.14%，表明该方法精密度良好。

2.7 重复性试验

精密称取取同一份样品溶液6份，按“2.3”项下制备溶液，依法测定，得RSD为1.29%，表明该实验方法重复性良好。

2.8 稳定性试验

精密吸取“2.3”项下同一供试品溶液，分别于0、2、4、8、16、24 h等时间点进行测定，得RSD为1.414%，表明天麻样品溶液在24 h内保持稳定。

2.9 回收率试验

精密称取同一批号已知含量的供试品6份，各约1 g，分别加入天麻素对照品适量，按“2.3”项下制备溶液，以“2.2”项色谱条件下测定，计算天麻素的平均回收率为99.76%，RSD为1.422%，说明该方法回收率良好，见表2。

2.10 样品测定

取不同天麻炮制品2 g，干燥，粉碎，过60目筛，精密称量，按“2.3”项下制备供试液，以“2.2”项下色谱条件，测定天麻素的含量，得天麻生品、姜制品和硫磺熏蒸品中天麻素的含量分別为0.458%、1.001%、0.406%，见表3。另取无硫栽培天麻生品，采用不同加工处理方法，按“2.3”项下制备供试液，以“2.2”项下色谱条件，测定天麻素含量，结果见表4。

3 讨论

天麻一般以四川、云南、贵州等省份列为道地药材，常以天麻素为主要质量控制评价指标，但其含量受多方面因素的影响[17-20]，如产地、炮制方法、干燥法、储存环境和提取方法等，其中炮制对其影响尤为明显。目前对天麻的炮制，仍以蒸制后晒干、切薄片为主，这是因为加热可灭活天麻素的分解酶，从而保护天麻素不受分解。传统的天麻干燥方法通常为真空干燥，该法能较好地保护天麻素不被分解。而硫磺熏蒸天麻，主要是为了防止虫蛀，便于保存，但药材经硫熏后，砷含量增加[21]，对机体易产生毒副作用。

天麻炮制历史沿革及近代地方炮制规范中均有记载，如采用酒、蒺藜子、浆水、姜、蜜、麦麸等法。如张连卫[22]提出采用生姜和酒炮制天麻，即天麻制成丸散，常以酒蒸面糊成丸，再以姜汤送服，或热酒温服，强调的是酒与姜对天麻的协同作用，但未就炮制机制展开研究。而建昌帮基于临床经验，提出了姜天麻的炮制方法，天麻经姜制后，可增强天麻镇痛止眩晕作用，但这一作用仍未在临床获得推广，其根本局限在于缺乏现代研究基础，而判断炮制对药材疗效高低的重要因素是依据其主要有效活性成分变化。

基于此，本研究故选择天麻素作用考察天麻炮制前后变化的主要有效指标，目的是探讨姜制对天麻素含量的变化情况。本研究结果表明，三种不同炮制品的含量分别为姜天麻1.001%、生天麻0.458%、硫磺熏蒸天麻0.406%。可见，以姜制天麻中天麻素含量相对较高。产生这一现象的原因，可能是由于天麻在姜制过程中，存在加热这一环节，使得姜汁中的某些易于溶出的成分加速了天麻素的溶出，提高了天麻素的溶出率；而硫磺熏蒸品，由于硫磺在熏蒸过程中，有大量砷离子被游离出来，砷含量升高，致使天麻素含量相对降低。但这种变化是否与天麻临床疗效密切关系，还有待进一步阐明，希望本研究能为深入研究天麻提供参考。

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（收稿日期：2017-09-14 本文编辑：张瑜杰）

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