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电针对酒精性周围神经病大鼠NGFmRNA受体的表达

时间:2022-11-25 17:45:12 公文范文 来源:网友投稿

摘要:目的 通过酒精自由饮建立慢性酒精中毒性大鼠周围神经病变模型,从细胞分子生物学等不同层面探讨电针对慢性酒精中毒型周围神经病的作用机制,为针灸治疗慢性酒精中毒性周围神经病的临床应用提供新的理论依据。方法 成年雄性WISTAR大鼠50只,体重200~250 g,随机分成5组,慢性酒精中毒模型组10只,弥可保对照组10只,电针组10只,针刺组10只,空白对照组10只。结果 正常坐骨神经的NGFmRNA表达量极低,酒精中毒损伤后坐骨神经NGFmRNA表达明显增高;2~4 w NGFmRNA的表达出现一轻度回落趋势,但4 w后又继续升高。针刺治疗后,治疗组的NGFmRNA表达较模型组均有不同程度升高,其中电针组升高幅度最为明显,始终处于高水平。结论 电针可升高酒精中毒性大鼠坐骨神经中NGFmRNA的含量

关键词:电针;慢性酒精中毒性周围神经病;NGFmRNA

1资料与方法

1.1一般资料 成年雄性WISTAR大鼠50只,体重200~250 g,随机分成5组,空白对照组10只,慢性酒精中毒模型组10只,弥可保组10只,电针组10只,普针组10只。

1.2方法 弥可保组300 μg/Kg/d,注射于下肢肌肉,左右腿交替以利于吸收,共治疗8 w;电针组取双侧脾俞、肾俞、后三里、环跳、三阴交、太溪,进针后接KWD-808II脉冲电疗仪,肾俞、足三里接一对导线,采用疏密波,电流量以大鼠肢体肌肉轻度收缩为度,留针20分针,1次/2 d,共治疗8 w;普针组除不接电麻仪外余处置同电针组;正常对照组和模型组每日肌肉注射等量的生理盐水。

1.3取材 治疗后2,4,8 w取治疗组大鼠神经损伤部位远侧坐骨神经干0.6 cm,迅速置入4%多聚甲醛溶液固定。另取其他各组大鼠10只,取其右侧坐骨神经相应部位神经干,作为正常神经标本,用以检测正常神经NGFmRNA。标本经4%多聚甲醛溶液固定24 h后,脱水,石蜡包埋。常规石蜡切片,厚度为4 um。载玻片需要经过高温火活RBA酶,APES镀膜。切片置4℃冰箱保存。

1.4统计学分析 用SPSS 13.0软件包统计处理,各组数据用均数±标准差(x±s)表示,多组均数之间的比较应用方差分析,两两比较应用q检验。等级资料组间比较应用秩和检验。检验的显著水平为P<0.05。

2结果

2.1治疗前后坐骨神经NGFmRNA表达,针刺治疗后,治疗组的NGFmRNA表达较模烈组均有不同程度升高,其中电针组升高幅度最为明显,始终处于高水平,见表1。

2.2治疗后坐骨神经NGFmRNA表达的时相变化,模型组在观察期内基本无明显变化,而针刺治疗后NGFmRNA表达均明显升高,其中电针组升高最为明显,升高的速度明显高于其他治疗组,见图1。

图1 治疗后坐骨神经NGFmRNA表达的时相变化

3讨论

从发病的临床表现来看,本病应属中医"血痹"范畴,长期嗜酒伤及脾胃则气虚;酒热灼烁,日久阴津干涸,络脉失于濡养,四肢麻木无力,而成本病。足三里调补脾胃;肾俞、三阴交、太溪益肾滋阴,补益气血,共奏益气生津,养阴通络之功。电针刺法是用电针器输出脉冲电流,通过毫针作用于人体经络穴位以治疗疾病的一种方法,是毫针的刺激与电的生理效应的结合,电针的应用与"行针"机制相同,是一种稳定的刺激,加强了针灸疏通经络气血的作用。

本病的主要病理改变为周围神经轴突变性、脱髓鞘和神经纤维缺失。神经生长因子(NGF)属于神经营养家族,对感觉神经和交感神经的存活、分化、生长、成熟和凋亡等均起着重要的作用,被认为有促进周围神经损伤修复的功能,目前的研究认为,NGF通过两种受体其作用,即神经生长因子低亲和力受体(P75),和神经生长因子高亲和力受体(TrkA),神经生长因子就是通过这两种跨膜糖蛋白受体的介导而发挥其生物学功能,NGF与两种受体结合后,可激活促凋亡的转录因子NF-kβ,也可以引起鞘磷脂水解成神经酰胺,提高-Jun氨基末端激酶(JUN)的活力,最终导致细胞凋亡。因此,本实验课通过酶联免疫手段和方法来研究电针对神经生长因子表达的影响来探讨其治疗机理。本研究治疗组的NGFmRNA表达均有不同程度的增长,其中电针的NGFmRNA表达最强,说明电针对促进周围神经损伤再生的效果最佳。这可能是由于电针可兴奋构成运动神经干的工、II和III类纤维,其疗效更为明显,这也可能是位电针促进周围神经再生的形态学机制之一。

编辑/肖慧

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