应用拮抗和ISSR方法综合鉴定灰树花菌株

工作者开展杂交育种工作。因此，收集鉴定主栽的灰树花菌株，分析其亲缘关系，为今后的杂交育种提供依据具有重要的现实意义。 【前人研究进展】拮抗反应是真菌体细胞不亲和性的具体体现[14]，可用于鉴定食用菌品种遗传差异，利用菌株之间的拮抗反应判断两者的亲缘关系。具有操作简单，快速的优点[15]，但对于遗传背景较相近的菌株难以鉴别[16]。如体细胞亲和的菌株可能为同一菌株，也可能存在遗传差异，表现为拮抗线弱或无。即两个菌株没有拮抗反应，则不能确定是相同菌株。因此拮抗只能作为食用菌菌株鉴定的初步方法。而分子生物学方法能直接从 DNA水平上反映其遗传关系，更客观和准确[17]。ISSR是以PCR技术为核心，基于简单重复序列扩增多态SSR建立的一种分子标记技术[18]，广泛用于食用菌菌株鉴定、遗传多样性分析及杂交育种等方面[19]，ISSR技术结合了RAPD和SSR方法的优点，具有稳定性强、重复性高的特点[20]。王春晖等[21]等利用ISSR和RAPD标记对8个灰树花栽培菌株进行遗传多样性分析，16个ISSR引物将8个菌株分为4个大类。温志强等[22]利用RAPD、ISSR、SRAP等3种DNA分子标记分别对不同来源的30个灰树花菌株进行鉴别，在D=0.77的相异系数水平上，可以将30个灰树花菌株分为10个类群，其中包括6个单一类别和4个复合类群。【本研究切入点】ISSR分子标记在灰树花菌株鉴定上有一定的应用，但目前鲜见采用拮抗和ISSR-PCR相结合对灰树花菌株进行鉴定和遗传多样性分析的研究报道。【拟解决的关键问题】本研究采用拮抗和ISSR-PCR相结合对收集的11个灰树花菌株进行鉴定和遗传多样性分析，以期更准确、更科学鉴定收集的灰树花菌株，确定其亲缘关系，为杂交亲本选配及今后的新品种的育种工作奠定基础。

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